（一）一抗的考虑因素
1、分析或者应用类型： 识别相同蛋白的不同抗体，由于识别位点不同，决定了不同的使用用途。
2、靶标种属:检测样本的种属。为了准确识别蛋白，需要找到正确的相对应的靶标种属。
3、样品的性质： 刺激宿主动物产生抗体的抗原物质种类繁多，包括全长的蛋白、蛋白片段、多肽、整个生物机体（例如细菌）或细胞。免疫原通常在说明书中会有显示。
4、样品的物种：选择抗体的时候，首选和待检测样本同一物种抗原制备的抗体。由于不同物种之间氨基酸序列的同源性，抗体有可能和其它物种的同一靶蛋白反应。说明书上没有提到的物种，并不代表抗体不可以用来检测这种样品，但是由于来自该物种的样品未被检测过，因此很难推荐它的适用性。
5、一抗的宿主物种： 一般来说，当用标记二抗来检测非标记一抗时，产生一抗的宿主动物的类别就非常重要。对于免疫组化，产生一抗的宿主应尽可能和样品的宿主种类不同，以避免二抗与样品中内在的免疫球蛋白发生潜在的交叉反应。生产抗体的种属，决定二抗的选择。
①常见商业化宿主:兔和小鼠
②一抗宿主决定二抗:若一抗的宿主是小鼠，则需要选择抗小鼠的二抗
③多重染色:尽量选择不同种属来源的一抗假如
6、蛋白质修饰(PTM)：蛋白质修饰的六种常见类型及其常用研究方法：磷酸化（Phosphory tation）、乙酰化（Acetytatation）和甲基化（Methy tation）、泛素化（Ubiquitytation）和糖基化（Glycosytation）、羟基化（Hydroxytation）
7、偶联物（标记物）：根据检测方法和检测仪器综合决定。直接法：流式抗体通常带偶联物。间接法：WB IF 更长使用间接标记法，即使用二抗搭配一抗的方法。
8、抗体的标记和检测：双重染色抗体的选择和标记抗体的选择。
9、抗体克隆性:分为单克隆抗体、多克隆抗体。单克隆抗体指的是单一克隆B细胞杂交流产生，只识别抗原分子上某一特定的抗原表位，特异性强，批次间差异小；多克隆抗体可识别多个抗原表位，敏度高，批次间差异较大
（二）抗体抗原检测
1、抗体检测是指检查机体是否对病原体（抗原）产生相应抗体。
2、抗原检测是指检查体内是否有，有多少病原（抗原）感染。
3、检出时间点不同。
①抗原检测一般在疾病的发展过程都能检测到（除恢复期），也就是说抗原在疾病的潜伏期、急性期或病程初期就可检测到。
②抗体要晚一些，需要先要有抗原刺激产生，因为抗体生成需要时间， 不同时间段检测到不同的分型抗体来判断病程进展程度，如急性感染期是IgM抗体为主而疾病恢复期是以IgG抗体为主。
4、针对对象不同。
①抗体检测：针对特异性抗体或者检测大分子物质，利用抗原抗体的特异性结合反应，判定有无（定性）。
②抗原检测：大部分针对的是DNA或RNA，利用DNA的半保留复制，检测数量（荧光PCR可定量）。
5、适用用途不同。
①抗体检测：操作简单，方便快捷，多用于做免疫程序的评估，检测疾病的感染率等。
②抗原检测：可用于疾病诊断，分析发病主因，尤其是突发疫病的确诊，同时可基因测序确定病原基因型，对症用苗。
（三）一抗的运用
1、酶联免疫吸附测定（ELISA）：ELISA更适合定量检测胞外的分泌性蛋白（空间构象）
2、蛋白免疫印迹（WB）：WB多用于胞膜、胞浆或胞核蛋白的半定量检测（线性表位）
3、免疫组化（IHC）：IHC主要用于胞蛋白的定性定位（空间构象）
（四）建议
1、建议分装存储，避免反复冻融造成蛋白降解。抗体存储温度均是经过存储稳定性测试的，个别情况下抗体需存放于4度，以防结晶造成蛋白不可逆的变质。50%甘油的加入，可以保持抗体在-20%C仍呈液体状态，避免冻融影响抗体稳定。
2、建议现配现用。通常情况下，蛋白以较高的浓度保存才不易发生降解或失活。抗体母液中加入的BSA等蛋白质稳定剂，就是为了提蛋白质浓度来协助保存抗体的用途。此外抗体一般都使用的低蛋白吸附的ep管分装。