PAGE凝胶超快速制备试剂盒15%

PAGE Gel Fast Preparation Kit

PAGE凝胶超快速配制试剂盒

产品内容：

产品简介：

本试剂盒适用于Tris-甘氨酸电泳体系，其中包括PAGE凝胶制备所需全套试剂，只需自备超纯水和制胶器具，不需要额外加入TEMED，即可制备PAGE凝胶。所配置的浓缩胶带有颜色，便于上样。本试剂盒中过硫酸铵以溶液形式提供，可保证过硫酸铵溶液在4℃稳定保存三个月。

本试剂盒分离胶和浓缩胶缓冲液均含有SDS，只适用于变性凝胶电泳，如需要分析非变性天然蛋白，建议选购我公司 Native-PAGE非变性凝胶快速制备试剂盒。

保存方法：

本试剂盒保存于4℃，其中改良型过硫酸铵溶液长期储存置于-20℃，1年有效。

操作步骤：

I. 灌制分离胶（以一块0.75/1.00/1.50mm厚的mini胶为例）

1. 参照凝胶模具说明书，装配好凝胶模具。

2. 取等体积的分离胶溶液（2×）和分离胶缓冲液（2×），各2 / 2.7 / 4mL，混匀。

3. 向混合溶液内加入40 /54 / 80ul的改良型过硫酸铵溶液，轻轻搅拌使其混匀，避免产生气泡。

4. 在凝胶模具中灌入适量分离胶溶液，使液面距离短玻璃板上沿约1.5cm即可，然后再分离胶溶液上轻轻覆盖上一层水层，使凝胶表面保持平整。

5. 室温静置6-10分钟，待分离胶和水层之间出现清晰界面后，说明胶已凝固。

II. 灌制浓缩胶

1. 去除覆盖在分离胶上的水层。

2. 取等体积的浓缩胶溶液（2×）和浓缩胶缓冲液（2×），各0.5 / 0.75 / 1mL，混匀。

3. 向混合溶液内加入10 / 15/ 20ul的改良型过硫酸铵溶液，轻轻搅拌使其混匀，避免产生气泡。

4. 将浓缩胶溶液加至分离胶的上层，直至凝胶溶液到达前玻璃板的顶端。将梳子慢慢插入凝胶内，避免产生气泡。

5. 静置10~15分钟，等待浓缩胶凝固，小心地拔出梳子，用注射器或枪头，吸取电泳缓冲液将加样孔冲洗干净，即可进行常规电泳操作。

注意事项：

1. 蛋白条带的清晰和平直与电泳条件相关，如果需要蛋白条带更加清晰、平直，建议电泳时电压在100-120V之间，如需要加快电泳速度，可增加至150V。

2. PAGE凝胶的凝聚速度与温度和过硫酸铵的用量密切相关，可通过改变过硫酸铵的用量，控制PAGE凝胶的聚合速度，凝胶聚合过快不利于操作，应根据实际操作情况做适当的调整。

3. 本产品已加入TEMED替代品，如需进一步加速凝胶，可在配置时加入TEMED。

4. 在分离胶上层加纯水时要小心操作，加水时速度不能太快。

5. 为了您的安全和健康，操作时请穿着实验服并佩戴一次性手套。

附表1. SDS-PAGE分离胶的浓度与最佳分离范围